Question 1

¿Cómo funciona el cultivo celular?

Accepted Answer

El cultivo celular implica el crecimiento de células en medios seleccionados específicamente para el tipo celular elegido, ya sea como una suspensión o un cultivo adherente (monocapa). Normalmente, los medios contendrán compuestos como aminoácidos, glucosa, vitaminas, sales inorgánicas y lípidos. También pueden contener suero animal, factores de crecimiento, hormonas, antibióticos y antioxidantes. Hay varios tipos de medios disponibles, que incluyen opciones basadas en suero, sin suero, sin animales, sin proteínas y definidas químicamente, que pueden complementarse con otros componentes, por ejemplo, suero de ternera. Luego, las células se cultivan en una incubadora para garantizar que se mantengan las condiciones óptimas de crecimiento celular, como la temperatura y el contenido de oxígeno y dióxido de carbono. Las células cultivadas requieren un suministro constante de nutrientes para mantener un crecimiento saludable, por lo que el medio debe reponerse con regularidad. Además, las líneas celulares adherentes deben subcultivarse una vez que alcanzan la confluencia, el punto en el que la superficie disponible está completamente cubierta, para permitir un crecimiento continuo. Es vital prevenir cualquier contaminación del cultivo, ya sea química o biológica, tanto durante el reemplazo del medio como durante el subcultivo.

Question 2

¿Para qué sirve el cultivo celular?

Accepted Answer

El cultivo celular tiene muchas aplicaciones en investigación, bioproducción y diagnóstico. Los cultivos de células animales, vegetales y bacterianas se utilizan habitualmente para estudiar los procesos biológicos y la genética, así como para producir moléculas de origen biológico, incluidas vacunas, proteínas, enzimas, anticuerpos y hormonas. Por ejemplo, en el descubrimiento y desarrollo de fármacos, los cultivos de células de mamíferos proporcionan modelos para el estudio de enfermedades, lo que permite la identificación y validación del objetivo. También se utilizan en ensayos de detección celular de alto rendimiento para probar la eficacia y seguridad de posibles nuevos fármacos. En un entorno clínico, las técnicas de cultivo celular se utilizan a menudo para determinar el organismo responsable de una enfermedad infecciosa e identificar los agentes antimicrobianos más eficaces para tratarla.

Question 3

¿Por qué usarías técnicas de cultivo celular?

Accepted Answer

Las técnicas de cultivo celular son una herramienta extremadamente importante en biología celular y molecular. Proporcionan a los investigadores sistemas de modelos excelentes para estudiar la fisiología y bioquímica normal de las células, los efectos de los fármacos y compuestos tóxicos, y la mutagénesis y carcinogénesis.

Question 4

¿Cuál es el impacto del agua en el cultivo celular?

Accepted Answer

Los cultivos contaminados y la muerte celular son un problema importante que puede tener un impacto negativo en los experimentos posteriores. El agua se usa en muchos pasos del proceso de cultivo celular: es el componente principal de los tampones y los medios, y puede usarse para disolver aditivos y medicamentos. El uso de agua purificada es esencial para obtener resultados experimentales exitosos, ya que los cultivos se ven afectados negativamente por microorganismos contaminantes, desechos y subproductos celulares biológicamente activos y compuestos orgánicos e inorgánicos.

Question 5

¿Qué tipos de contaminantes en el agua pueden afectar los resultados del cultivo celular?

Accepted Answer

1. Bacterias Las bacterias prosperan en las condiciones típicas de cultivo de células y pueden superar rápidamente a las células de interés, lo que hace que disminuyan los niveles de nutrientes y aumenten los subproductos tóxicos. La contaminación bacteriana también puede provocar cambios repentinos en el pH del medio y la contaminación de cultivos previamente puros. 2. Endotoxinas Las endotoxinas son liberadas por la mayoría de las bacterias Gram negativas. Estas endotoxinas afectan a varios tipos de células, incluso aquellas que carecen de receptores de endotoxina CD14, y estimulan a los macrófagos y fagocitos mononucleares para que liberen una variedad de citocinas proinflamatorias. Los efectos adversos resultantes incluyen cambios en el crecimiento y la función celular, la producción de proteínas recombinantes y una reducción en la eficiencia de la clonación. 3. Compuestos orgánicos Los pequeños compuestos orgánicos que se encuentran comúnmente en el agua, como ácidos húmicos, taninos, pesticidas y disruptores endocrinos, pueden afectar el desarrollo celular. Proporcionan una fuente incontrolada de nutrientes para el crecimiento bacteriano y deben eliminarse del agua utilizada para la preparación de materiales para el cultivo celular. 4. Iones Los contaminantes iónicos, en particular los iones multivalentes y los metales pesados, deben mantenerse bajos. Se sabe que los metales pesados, por ejemplo, el mercurio y el plomo, son citotóxicos para una variedad de tipos de células.

Question 6

¿Cuáles son los requisitos de medición de agua para cultivo celular?

Accepted Answer

Es fundamental utilizar el tipo de agua adecuado para su aplicación. El agua para el cultivo de células de mamíferos requiere típicamente agua apirógena, ultrapura de Tipo I, aunque el agua de Tipo II + es adecuada para cultivos de células bacterianas, que son menos sensibles. Se debe utilizar agua de Tipo I para la preparación de medios y tampones para garantizar que las células estén efectivamente libres de contaminantes bacterianos, de levadura y virales.

Question 7

¿Cómo resuelve ELGA los problemas de pureza del agua para el cultivo celular?

Accepted Answer

La experiencia y la reputación de ELGA garantizan que su equipo experto pueda ayudar a los clientes a determinar el nivel de pureza del agua requerido para sus aplicaciones. La empresa ofrece una gama de sistemas de purificación de agua para aplicaciones de cultivo celular, cada uno con sus propias ventajas y limitaciones. Por ejemplo, la gama CENTRA® de sistemas centralizados de purificación y distribución ha revolucionado la forma en que se producen, almacenan y distribuyen grandes volúmenes de agua pura en los laboratorios. El CENTRA R-200 es un sistema completo de purificación, almacenamiento, control y distribución de agua que proporciona agua pura Tipo I (Ultrapura), Tipo II y Tipo III, con un módulo de ósmosis inversa de 200 litros por hora y filtros de 0,2 µm.

Question 8

¿Cuáles son las conclusiones del cultivo celular?

Accepted Answer

El cultivo celular es una herramienta clave en biología celular y molecular, y los requisitos exactos de agua están determinados por el tipo de cultivo. El agua para el cultivo de células bacterianas debe ser al menos de calidad Tipo II +, mientras que el cultivo de células de mamíferos más sensible requiere agua ultrapura de Tipo I con alta resistividad (> 18 MΩ.cm) y esencialmente libre de bacterias, endotoxinas y otros contaminantes. La amplia gama de sistemas de purificación de agua de ELGA ayuda a los laboratorios de todo el mundo a realizar técnicas de cultivo celular sin preocuparse por las impurezas del agua.

	Sensibilidad necesaria	Resistividad (MΩ.cm)*	TOC (ppb)	Filtro (µm)	Bacterias (CFU/ml)	Endotoxinas (EU/ml)	Nucleasas	Grado del agua
Cultivo de celdas bacterianas	General	>1	<50	<0,2	<1	N. d.	N. d.	II
Cultivo de celdas de mamífero	Alto	>18	<10	Ultrafiltro	<1	<0,002	No detectado	I
Cultivo de tejido vegetal	Alto	>18	<10	Ultrafiltro	<1	<0,002	No detectado	I
Histología	General	>1	<50	<0,2	<1	N. d.	N. d.	Laboratorio general
Hidroponía	General	>1	<50	<0,2	<1	N. d.	N. d.	Laboratorio general

Cultivos celulares

Los cultivos celulares son una técnica de laboratorio de uso común, donde las células se cultivan en condiciones controladas, normalmente fuera de su entorno natural.

Requisitos del agua

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